|
Detail produk:
|
| Nama Produk: | DNA ligase | 10299ES40: | 40.000 U |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400.000 U | 10299ES83: | 1.600.000 U |
| Masukan DNA mol (pmol): | Masukan DNA(ng)/ [0.66 × Panjang rata-rata DNA masukan(bp)] | Aplikasi: | untuk penggunaan penelitian HANYA! |
| Cahaya Tinggi: | 400 U/UL T4 DNA Ligase,Penelitian T4 DNA Ligase,T4 DNA Ligase Biochemical Reagen |
||
Ligase DNA T4 cepat (400 U/µL)
Fast T4 DNA Ligase adalah produk enzim tunggal yang dapat digunakan untuk menghubungkan fragmen DNA dan adaptor dalam proses pembangunan perpustakaan NGS.Produk telah diverifikasi oleh urutan throughput tinggi dan memiliki kualitas yang sangat baik.Enzim ini memiliki kemampuan ligasi yang sangat efisien, yang sangat cocok untuk ligasi fragmen asam nukleat kompleks, seperti adaptor platform MGI.Disarankan untuk memilih Hieff NGSTM Ultima DNA Ligation Module (Cat #12604) yang komponen intinya adalah Fast T4 DNA Ligase untuk pelanggan yang tidak memerlukan penyesuaian sistem.
| Nama Produk | Kucing# | Ukuran |
| Ligase DNA T4 Cepat (400 U/µL) | 10299ES40 | 40.000 U |
| 10299ES42 | 400.000 U | |
| 10299ES83 |
1.600.000 U |
Deskripsi Produk tentangLigase DNA T4 cepat
Fast T4 DNA Ligase adalah produk enzim tunggal yang dapat digunakan untuk menghubungkan fragmen DNA dan adaptor dalam proses pembangunan perpustakaan NGS.Produk telah diverifikasi oleh urutan throughput tinggi dan memiliki kualitas yang sangat baik.Enzim ini memiliki kemampuan ligasi yang sangat efisien, yang sangat cocok untuk ligasi fragmen asam nukleat kompleks, seperti adaptor platform MGI.Disarankan untuk memilih Hieff NGSTMModul Ligasi DNA Ultima (Cat #12604) yang komponen intinya adalah Fast T4 DNA Ligase untuk pelanggan yang tidak memerlukan penyesuaian sistem.
Komponen Produks dariLigase DNA T4 cepat
| Nomor komponen | Komponen | Kucing#/Ukuran | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-A | Ligase DNA T4 Cepat (400 U/µL) | 100 L | 1 mL | 4 mL |
| 10299-B | 10 × T4 DNA Ligase Buffer | 250 L | 5 × 500 L | 10 mL |
instruksi
1. Kit konstruksi perpustakaan DNA arus utama saat ini umumnya tidak dimurnikan setelah perbaikan akhir dan perawatan A-Tailing, dan langsung melakukan ligasi adaptor.Silakan lihat persiapan berikut untuk sistem reaksi.Vortex secara menyeluruh, putar sebentar dan inkubasi selama 15 menit pada 20 ° C.
| Komponen | Volume (μL) |
| DNA berekor dA | 60 |
| 10 × T4 DNA Ligase Buffer | 10 |
| 50% PEG 6000 | 10* |
| Adaptor DNA | X** |
| Ligase DNA T4 Cepat (400 U/µL) | 1-5*** |
| ddH2HAI | Sampai dengan 100 |
[Catatan]:*50% PEG 6000 tidak tersedia dalam kit, Anda harus menyiapkannya sendiri.
**Lihat tabel berikut untuk jumlah adaptor.
***JumlahCepatT4 DNA Ligase yang digunakan dapat ditambahkan 1-5 L sesuai kebutuhan.
2. Kualitas dan konsentrasi adaptor yang digunakan secara langsung mempengaruhi efisiensi ligasi dan hasil perpustakaan.Terlalu banyak penggunaan adaptor dapat menghasilkan lebih banyak dimer adaptor, sementara penggunaan yang lebih rendah dapat memengaruhi efisiensi ligasi dan hasil pustaka.Tabel berikut mencantumkan jumlah adaptor yang disarankan yang digunakan dalam situasi DNA Input yang berbeda menggunakan kit ini.
| Masukan DNA |
Adaptor: Masukan DNA (rasio molar) |
Masukan DNA |
Adaptor: Masukan DNA (rasio molar) |
| 1 g | 10:1 | 50ng | 100: 1 |
| 500ng | 20: 1 | 25 ng | 200: 1 |
| 250 ng | 40:1 | 1 ng | 200: 1 |
| 100ng | 100: 1 | 500 hal | 400:1 |
[Catatan]: Masukan DNA mol (pmol)≈ Masukan DNA(ng)/ [0.66 × Masukan DNA panjang rata-rata (bp)].
Langkah 1: Hitung jumlah mol DNA masukan.Rumus: Masukan DNA mol (pmol)≈ Masukan DNA(ng)/ [0.66 × Masukan DNA panjang rata-rata (bp)];Masukan mol DNA (pmol)=100 (0,66×300) = 0,5 pmol;
Langkah 2: Menurut tabel di atas, hitung jumlah mol adaptor yang ditambahkan.;Ketika DNA Input adalah 100ng, rasio molar adaptor: DNA input adalah 100:1, dan jumlah mol adaptor yang ditambahkan=100×0,5 pmol=50 pmol;
Langkah 3: Hitung volume penambahan adaptor.Konsentrasi adaptor = 15 mol/L (jika Anda menggunakan adaptor perusahaan lain, Anda perlu menentukan konsentrasinya sesuai dengan instruksinya);Volume adaptor yang ditambahkan = mol adaptor yang ditambahkan (50 pmol) konsentrasi adaptor (15 mol/L) = 3,34 L (Catatan: 15 mol/L = 15 pmol/ L);
kesimpulan, volume yang dapat ditambahkan adaptor adalah 3,4 L.(Catatan: Volume penambahan maksimum adaptor tidak melebihi 5 L).
Produk dikirim dengan paket es dan dapat disimpan pada suhu -20°C selama dua tahun.
Definisi Satuan
Dalam sistem reaksi ligasi 20 L, ketika 6 g DNA-Hind direaksikan pada 16℃ selama 30 menit, jumlah enzim yang dibutuhkan untuk memberikan lebih dari 50% ligasi fragmen DNA didefinisikan sebagai satu unit (U).
Perhatian
1. T4 DNA Ligase sensitif terhadap denaturasi fisik.Saat mencampur, balikkan tabung dengan lembut dan kocok dengan baik.Jangan mengocok dengan kuat;
2. Enzim harus disimpan dalam kotak es atau di atas penangas es saat digunakan, dan harus disimpan pada suhu -20°C segera setelah digunakan;
3.Produk ini hanya untuk penggunaan penelitian!
4.Demi keselamatan dan kesehatan Anda, mohon kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai untuk operasi.
Jika Anda memerlukan info lebih lanjut tentang ligase DNA T4 Cepat ini (400 U / L), silakan hubungi kami, terima kasih
Kontak Person: Ms Kris
Tel: +8613049739311
